定做營(yíng)養瓊脂培養基配制操作要點(diǎn)及常見(jiàn)注意哪些方面
日期:2021-10-25 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:2467 次
簡(jiǎn)單講述瓊脂概念:
瓊脂(Agar)是一類(lèi)從植物中提煉的多糖,主要是來(lái)自于海藻植物。在微生物培養基中,瓊脂通常只是用來(lái)作為凝固劑使用。液體培養基中瓊脂的增加量一般來(lái)說(shuō)為0.5至2克/升,使中.海培養基有著(zhù)一定的粘稠度,避免液體相互對流,經(jīng)常使用于厭氧培養。半固體培養基中瓊脂增加量為三點(diǎn)五至四克/升,經(jīng)常使用于菌種保藏和動(dòng)態(tài)性檢驗檢測。固體培養基中瓊脂的添加量為十二至十五克/升。植物組織培養基中瓊脂增加量為五至十克/升。
一般來(lái)說(shuō),瓊脂粉為白色、淺黃色或淺灰色粉末,不溶解于冷水。只有在加溫燒開(kāi)或高壓滅菌能夠使瓊脂充分均勻溶解。絕大多數瓊脂的熔點(diǎn)在九十攝氏度上下,冷卻后后能夠凝結成固態(tài)。大部分瓊脂的冰點(diǎn)在四十攝氏度上下。盡管重復加溫和冷卻后能夠使瓊脂頻繁在液態(tài)和固態(tài)兩者之間發(fā)生變化,同時(shí)瓊脂的凝膠強度會(huì )隨著(zhù)反復的次數愈來(lái)愈低。
配制營(yíng)養瓊脂培養基操作要點(diǎn)
①通過(guò)營(yíng)養培養基標簽貼稱(chēng)加入適量培養基粉劑溶解于純凈水,加溫燒開(kāi)至瓊脂全部充分均勻溶解,裝進(jìn)試管或錐形瓶中;
②在標準規定的環(huán)境下對分裝的培養基實(shí)行高壓蒸汽滅菌。高壓蒸汽滅菌后的培養基能夠重復燒開(kāi)四至六次,直到培養基結束了。全部充分均勻溶解后,倒進(jìn)盤(pán)里,制作而成平板安全使用;
③高壓蒸汽滅菌后,待中'海培養基冷卻后至五十攝氏度上下后,可放置在四十七至五十攝氏度的水浴中保溫。水浴工作溫度可通過(guò)培養基具體凝結工作溫度適當提升 ,置放時(shí)長(cháng)一般來(lái)說(shuō)不超過(guò)四個(gè)鐘頭。
④瓊脂培養基操作使用前,添加一定的添加劑物質(zhì),混勻倒進(jìn)平板里,凝結儲備用;或是制作成斜面傾注使用等。聯(lián)系中海生物www.91anmoyi.cn瓊脂培養基定制咨詢(xún)
營(yíng)養瓊脂培養基配制常見(jiàn)注意哪些方面
①充分均勻溶解粉劑時(shí),提議水的溫度在四十攝氏度以?xún)?,不超過(guò)六十攝氏度。瓊脂曝露在開(kāi)水中,其外層非常容易吸水發(fā)硬,生成硬結,并不有利于分散化和充分均勻溶解。所以,在充分均勻溶解粉劑時(shí),以涼水為宜,并始終保持攪拌至分散化均勻無(wú)結團,再實(shí)行加溫正確處理;
②高壓蒸汽滅菌前需將瓊脂加溫燒開(kāi)至全部充分均勻溶解分散化均勻,才能分裝試管或錐形瓶;要不然,分裝后應該發(fā)生瓊脂分散不均勻、凝固性不一樣的具體情況;高壓蒸汽滅菌前加溫、燒開(kāi)、充分均勻溶解有利于促進(jìn)加速高壓滅菌環(huán)節中的熱量滲透性,提升高壓蒸汽滅菌實(shí)際效果,減少高壓蒸汽滅菌不成功的幾率。
③凝固營(yíng)養瓊脂培養基不可以再一次高溫高壓滅菌。假如中海培養基中的物質(zhì)比較穩定,它們能夠再一次充分均勻溶解在開(kāi)水浴中。
④需用增加抗生素或別的不穩定物質(zhì)的培養基,在安全使用前要在培養基冷卻后至五十至五十五攝氏度時(shí)增加,這樣的物質(zhì)在過(guò)早或過(guò)熱時(shí)增加,非常容易造成不穩定因素。不利于不穩定物質(zhì)溶解,從而減少培養基安全使用實(shí)際效果;
⑤凝結后的培養基不可頻繁加溫溶解處理。重復加溫非常容易溶解培養基中的營(yíng)養元素,瓊脂的凝膠強度會(huì )減少。通常物質(zhì)比較穩定的培養基能夠充分均勻溶解一次性使用。
⑥凝結的瓊脂培養基不可存放在冷藏環(huán)境下。中 海培養基的冷藏會(huì )嚴重破壞瓊脂的內部構造,造成失去水分或凝固性差,瓊脂特性也發(fā)生了變化。
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